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{{Multiple issues
|no footnotes = February 2010
|context = December 2010
|confusing = December 2010
}} '''Fluorescence cross-correlation spectroscopy''' (FCCS) was introduced by Eigen and Rigler in 1994 <ref>Eigen, M. and Rigler, R.  Sorting single molecules: Application to diagnostics and evolutionary biotechnology.  (1994) ''Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.''  '''91,''' 5740-5747.</ref> and experimentally realized by Schwille in 1997.<ref>Schwille, P.; Myer-Almes, F.J.; Rigler, R.  Dual-color fluorescence cross-correlation spectroscopy for multicomponent diffusional analysis in solution.  (1997) ''Biophys. J.''  '''72,''' 1878-1886.</ref> It extends the [[File:Fccs focus cartoon.svg|thumb|Cartoon of an FCCS Focal Volume]] [[fluorescence correlation spectroscopy]] (FCS) procedure in that it looks at the correlation between different colors rather than just the same color.  In other words, coincident green and red intensity fluctuations correlate if green and red labeled particles are moving together. As a result, FCCS provides a highly sensitive measurement of molecular interactions independent of diffusion rate.  This is an important advancement, given that diffusion rate depends only weakly on the size of the molecular complex.  FCCS utilizes two species which are independently labeled with two differently colored fluorescent probes. These fluorescent probes are excited and detected by two different laser light sources and detectors usually labeled as “green” and “red”. Typically a [[confocal]] microscope is used to provide overlapping green and red focal volumes for excitation.  [[File:FCCS Simulations.svg|thumb|FCCS Simulations demonstrating non-interacting particles (left) and a mixture of interacting and independent particles (right)]]


The normalized cross-correlation function is defined for two fluorescent species <math>\ G</math> and <math>\ R</math> which are independent green, G and red, R channels as follows:


<math>\ G_{GR}(\tau)=1+\frac{\langle \delta I_G(t)\delta I_R(t+\tau)\rangle }{\langle I_G(t)\rangle\langle I_R(t)\rangle}=\frac{\langle I_G(t)I_R(t+\tau)\rangle}{\langle I_G(t)\rangle \langle I_R(t)\rangle}</math>
Peu de gens peuent ne pas approcher salon comme il faut beaucoup de temps et aussi cher. Les personnes qui ne souhaitent pas isiter le salon fr��quemment, il est pr��f��rable pour eux d'acheter des fers plats ou des d��frisants qui peuent ��tre utilis��s �� leur domicile. Bien que l'achat d'un d��frisant, il est pr��f��rable d'acheter un outil de style GHD car il est fabriqu�� aec une technologie de pointe pour des usages multiples.


where differential fluorescent signals <math>\ \delta I_G</math> at a specific time, <math>\ t</math> and <math>\ \delta I_R</math> at a delay time, <math>\ \tau</math> later is correlated with each other.  In the absence of spectral bleed-through, the cross-correlation function is zero for non-interacting particles.  In contrast to FCS, the cross-correlation function increases with increasing numbers of interacting particles.
Il a reconnu qu'un petit nombre de chr��tiens peut s'opposer �� la publicit��, mais a d��clar�� qu'il ne croyait pas qu'ils causeraient infraction g��n��ralis��e ou grae. L'agence a ��galement soulign�� qu'il aait utilis�� la ligne de courroie 'une nouelle religion pour les cheeux ?pour plusieurs ann��es. Mais l'ASA a conclu que les images ��rotis�� de la femme, en collaboration aec des symboles religieux, Certains ebayers sont tout simplement ?r��am��nagement? de leur d��friser les cheeux ghd, dans lequel ous pouez obtenir beaucoup sur une occasion.


FCCS is primarily utilized for measurements of bio-molecular interactions both in living cells and in vitro.<ref>Bacia, K.; Kim, S.A.; Schwille, P. Fluorescence cross-correlation spectroscopy in living cells. (2006) ''Nat. Meth.''  '''3,''' 83-89 .</ref><ref>Slaughter, B. D.; Unruh, J. R.; Li, R. Fluorescence fluctuation spectroscopy and imaging methods for examination of dynamic protein interactions in yeast. ''In Methods in Molecular Biology: Yeast Systems Biology.'' J.I. Castrillo and S.G. Oliver, Eds. (Springer, New York, 2011). '''Vol. 759,''' pp. 283-306.</ref>  It can be utilized to measure simple molecular stoichiometry’s and binding constants.<ref>Chen, Y. and Mueller, J.D. Determining the stoichiometry of protein heterocomplexes in living cells with fluorescence fluctuation spectroscopy. (2006) ''Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.'' '''104,''' 3147-3152.</ref>  It is one of the few techniques that can provide information about protein-protein interactions at a specific time and location within a living cell.  In contrast to [[fluorescence resonance energy transfer]], it does not have a distance limit for interactions.  As a result it can be utilized to probe large complexes.  Nevertheless, it does require that complexes be actively diffusing through the microscope focus on a relatively short time scale (typically seconds).
  Bien que, certains ont peut-��tre tout simplement ebayers achet�� d��frisants ghd en rac et sont en mesure de les endre �� un prix r��duit, dans lequel ous pouez ��galement obtenir une offre sp��ciale sur un noueau. Pas admiration la copie am��thyste cheeux allocation de redresseur ensemble captur�� l'acuit�� de millions de consommateurs sur le monde. Le compte est acceptable que GHD ne abr��gement articles qui sera absolument ous brusquerie. Pour la pr��sente saison, la derni��re copie de d��friser les cheeux GHD allocation ensemble est maintenant accessible sur le march��.


==Modeling==
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Cross-correlation curves are modeled according to a slightly more complicated mathematical function than applied in FCS. First of all, the effective superimposed observation volume in which the G and R channels form a single observation volume, <math>\ V_{eff, RG}</math> in the solution:


<math>\ V_{eff, RG}=\pi^{3/2}(\omega_{xy,G}^2+\omega_{xy,R}^2)(\omega_{z,G}^2+\omega_{z,R}^2)^{1/2}/2^{3/2}</math>
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where <math>\ \omega_{xy,G}^2</math> and<math>\ \omega_{xy,R}^2</math> are radial parameters and <math>\ \omega_{z,G}</math> and<math>\ \omega_{z,R}</math> are the axial parameters for the G and R channels respectively.
tout type de ous ne pouez pas obtenir la coiffure que ous oulez, ou m��me br?ler les cheeux. Choisissez la meilleure temp��rature pour os cheeux, puis commencer �� traailler aec un peu de cheeux humides. Sandwich pas beaucoup de temps. M��me ainsi, m��me les plus grands amateurs de chiens tr��s chaudes ne sont g��n��ralement pas certain exactement ce que c'est raiment qu'ils consomment. Le symbole repr��sent�� par un triangle ayant un "K" �� l'int��rieur de l'emballage, comme sur h��breu Nationwide Francs-��limine le doute casher.


The diffusion time, <math>\ \tau_{D,GR}</math> for a doubly (G and R) fluorescent species is therefore described as follows:
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<math>\ \tau_{D,GR}=\frac{\omega_{xy,G}^2+\omega_{xy,R}^2}{8D_{GR}}</math>
 
where <math>\ D_{GR}</math> is the diffusion coefficient of the doubly fluorescent particle.
 
The cross-correlation curve generated from diffusing doubly labelled fluorescent particles can be modelled in separate channels as follows:
 
<math>\ G_G(\tau)=1+\frac{(<C_G>Diff_k(\tau)+<C_{GR}>Diff_k(\tau))}{V_{eff, GR}(<C_G>+<C_{GR}>)^2}</math>
 
<math>\ G_R(\tau)=1+\frac{(<C_R>Diff_k(\tau)+<C_{GR}>Diff_k(\tau))}{V_{eff, GR}(<C_R>+<C_{GR}>)^2}</math>
 
In the ideal case, the cross-correlation function is proportional to the concentration of the doubly labeled fluorescent complex:
 
<math>\ G_{GR}(\tau)=1+\frac{<C_{GR}>Diff_{GR}(\tau)}{V_{eff}(<C_G>+<C_{GR}>)(<C_R>+<C_{GR}>)}</math>
 
with <math>\ Diff_k(\tau)=\frac{1}{(1+\frac{\tau}{\tau_{D,i}})(1+a^{-2}(\frac{\tau}{\tau_{D,i}})^{1/2}}</math>
 
Contrary to FCS, the intercept of the cross-correlation curve does not yield information about the doubly labelled fluorescent particles in solution.
 
==See also==
*[[Dynamic light scattering]]
*[[Fluorescence spectroscopy]]
*[[Diffusion coefficient]]
 
==References==
{{reflist}}
 
[[Category:Spectroscopy]]
[[Category:Physical chemistry]]
[[Category:Fluorescence]]
[[Category:Biochemistry methods]]

Latest revision as of 16:27, 25 June 2014


Peu de gens peuent ne pas approcher salon comme il faut beaucoup de temps et aussi cher. Les personnes qui ne souhaitent pas isiter le salon fr��quemment, il est pr��f��rable pour eux d'acheter des fers plats ou des d��frisants qui peuent ��tre utilis��s �� leur domicile. Bien que l'achat d'un d��frisant, il est pr��f��rable d'acheter un outil de style GHD car il est fabriqu�� aec une technologie de pointe pour des usages multiples. 

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